In primo luogo, il tempo di centrifugazione
Il tempo di centrifugazione è un fattore molto importante che influenza l'effetto centrifugo. Il tempo di centrifugazione richiesto per i diversi metodi di centrifugazione sarà diverso. Quanto segue è un'introduzione dettagliata della centrifugazione differenziale e della centrifugazione in gradiente di densità uguale e centrifugazione in gradiente di densità. Per la centrifugazione differenziale, il tempo di centrifugazione si riferisce al momento in cui una determinata particella si deposita completamente sul fondo della provetta da centrifuga; per la centrifugazione in gradiente di isodensità, il tempo di centrifugazione si riferisce al tempo di equilibrio in cui la particella raggiunge completamente il punto di isodensità; Il tempo di centrifugazione di una centrifugazione in gradiente di densità si riferisce al tempo necessario per formare una zona ben definita. Per gli ultimi due metodi di centrifugazione, il tempo di formazione della zona richiesto o il tempo di equilibrio è complicato e può essere determinato dopo il test.
In secondo luogo, la velocità centrifuga
La velocità di rotazione della centrifuga è determinata principalmente dalla velocità di rotazione del rotore e dal raggio di rotazione delle particelle. Quando si descrivono le condizioni centrifughe, è spesso espresso dal relativo campo di forza centrifuga. Nel lavoro effettivo, i dati del campo di forza centrifuga si riferiscono al valore medio, cioè Si riferisce al campo di forza centrifuga delle particelle nel punto nella soluzione di centrifugazione.
In terzo luogo, il pH e la temperatura del mezzo di centrifuga
Il valore del pH del mezzo di centrifugazione è generalmente impostato nell'intervallo di pH in cui l'enzima è stabile. È possibile utilizzare una soluzione tampone. Nel test, si esegue la pesatura, e l'ambiente della centrifuga stessa viene corroso evitando l'ambiente di peracido o over-base.
Quando si lavora con una centrifuga, oltre a prestare particolare attenzione alla scelta del mezzo centrifugo, dobbiamo anche controllare la temperatura e il pH della soluzione del mezzo per evitare agglutinazione, denaturazione e disattivazione delle sostanze separate. Controlleremo la temperatura di centrifugazione a circa 4°C. Per alcuni enzimi con buona stabilità termica, la centrifugazione può essere effettuata anche a temperatura ambiente.